플랑크톤 등 해양생물체 및 연안 해 · 하수에 대한 콜레라균 오염도 및 서식가능성 연구

초록

목적 : 콜레라가 발생되었던 지역을 중심으로 국내 자연환경계에서의 콜레라균 서식여부 규명 및 해양생태계 변화연구를 통한 콜레라 발생 예방대책의 수립기초자료 마련 방법 : 1. 해양환경 변화에 따른 생태계의 변화 조사 :수온, 염도, pH, 일반세균수, 간만조 2. 해양플랑크톤에 대한 콜레라균 부착가능성에 대한 연구 :콜레라균 분리 3. 인공 해양환경 : 배양불가능 상태 콜레라균의 배양가능 상태로의 전환 요인 확인 4. Vibrio cholerae O1균 PFGE 유형확인, 비브리오 콜레라 항체가 조사 결과 : 해양환경 변화에 따른 해양 미생물 생태계의 변화를 확인한 결과, 매월 강화 인근 해수로부터 측정된 일반 세균의 수는 수온의 변화에 의존하는 경향을 보였으며, 간만의 차이에 따른 일반세균 수의 차이로 보아 육상기원의 영양요인에 의해서도 영향을 받음을 알 수 있었다. 이에 비해 염도, 산성도는 일반세균 수에 영향을 미치지 못했다. 대장균군 수의 경우 특별한 경향이 없었다. 해양환경 가검물로부터 V. cholerae균을 분리하기 위한 가장 효율적인 방법으로는 해수를 여과한 후 100ml의 APW에서 증균시키는 방법이 효율적인 것으로 밝혀졌으나 본 연구를 통해 V. cholerae O1은 공중보건망을 통해 입수되었었고 non-01 group이 분리되었다. 이들에 의해 PFGE 실험으로 확인한 결과 강화 인근에서 분리된 V. cholerae non-01 균주는 91년 이후 국내에서 분리된 V. cholerae O1 균주와 유전학적 연관성이 없었다. 인공해양환경 실험에서는 15℃ 처리의 경우 처리 80일 이후까지도 접종된 균의 수보다 격감되긴 하였으나 상당수 균이 생존, 이 온도에서는 VBNC 상태로의 유도가 어려운 것으로 확인되었으며 4℃처리의 경우 채취된 시료에서 배양 10일째까지도 집락이 나타나지 않는 시료에 대해 45℃ heat shock을 이용한 재생을 시도하였으나 재생된 균은 없었다. 한편 플랑크톤에 대한 콜레라균의 부착가능성 연구의 경우 플랑크톤의 생존기간이 콜레라균의 배양불가능 유도시기에 미치질 못해 유의한 결과를 얻을 수 없었다. 결론 : 1. 강화인근 해양환경요인 중 수온이 미생물생태계에 영향을 미침을 확인하였다. 2. 본 연구를 통해 해양환경으로부터 분리된 V. cholerae O1, non-01은 PFGE를 이용한 분자생물학적 유형분류를 시도하였을 때, 기존의 해외유입 및 국내발생 01 균주와 유전학적인 연관이 없는 것으로 확인되었다. 3. 인공해양환경 시험을 통해 VBNC 상태로의 유도와 VBNC 상태로부터의 재생을 시도하였지만 재생된 균은 없었다.

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