국내 임상 분리주 Streptococcus pneumoniae KNH1156으로부터 PspA 단백항원의 정제 및 면역원성 확인

초록

국내 분리 침습성 균주 중 선별된 S. pneumoniae KNIH1156 (type 19F)으로부터 폐렴구균의 병원성인자이며 항원 학적으로 다양한 표면단백항원인 pneumococcal surface protein A (PspA)를 분리·정제하였다. 폐렴구균을 CDMET 배지에서 배양하게 되면 배지내로 PspA가 방출된다는 점과 PspA가 인간의 lactoferrin에 특이적으로 결합한 다는 사실을 이용하여 CDM-ET 배지에서 S. pneumoniae KNIH1156을 배양한 후 배양액을 농축하여 lactoferrin affinity chromatography에 통과시켜 PspA를 분리, 정제하였다. 정제 후 anti-PspA antiserum으로 PspA를 확인하 여 순수분리, 정제되었음을 확인하였으며 또한 인간의 lactoferrin과의 결합능력을 유지하고 있음을 확인하였 다. 순수하게 분리하여 정제된 PspA의 면역원성을 확인하기 위하여 ICR mice에 복강주사하였을 때 LD50가 1× 107.5 CFU/ml에서 1×1010CFU/ml로 약 500배 증가함을 관찰하였다. 따라서 본 실험에서 S. pneumoniae KNIH1156 으로부터 분리·정제한 PspA가 면역원성과 방어능을 가지고 있음을 확인할 수 있었다.

키워드