백시니아 바이러스의 세포배양체계의 확립

초록

목적 : 최근 생물학적 무기를 사용한 생물학적 테러 및 생물학전의 가능성이 국제적으로 대두되고 있고 그 중에서도 특히 천연두바이러스를 사용한 생물학적 테러의 가능성에 대한 우려가 있어 이에 대비하기 위해 천연두 바이러스에 대한 진단체계의 확립과 치료백신 개발을 위해 백시니아바이러스를 이용한 세포배양체계를 확립하고 세포배양을 통해서 증식된 바이러스의 면역원성을 조사하였다ᅵ. 방법 : 백시니아바이러스의 세포배양체계를 확립하기 위해 Modified vaccinia ankara(MVA)와 Vaccinia vims ATCC VR119 strain에 대해 각각 BHK-21 세포주와 Vero 세포주를 이용하여 바이러스의 증식여부 및 역 가를 확인하였으며 세포배양을 통해 배양된 각각의 바이러스주를 Balb/C 마우스에 피하 및 근육접종의 두 가지 접종방법으로 10⁴ TCID50역가의 바이러스를 접종한 후 접종 후 일정간격으로 채혈하여 마우스의 혈청을 확보하고 간접형광항체법을 이용하여 백시니아 바이러스에 대한 특이적인 항체의 생성여부 및 항체의 역가를 확인하였다 결 과 : 세포배양체계를 이용하여 두 가지 백시니아 바이러스를 배양한 결과 접종 후 약 2일 후에 세포병변 효과를 관찰할 수 있었으며 두 바이러스 모두 10⁶⁻⁷TCID₅₀ 역가의 바이러스가 증식하는 것을 확인하였다. 마우스에서의 두 종류 바이러스의 면역원성 실험을 통해서는 접종 일주일 후부터 항체가 생성되기 시작하여 감염 후 3-4주에는 약 1. 64 - 1: 256 정도의 항체 역가가 확인되었다. 두 바이러스 중 Vaccinia VR119 strain이 MVA를 면역시킨 것 보다 다소 면역반응이 강하게 유도되었으며 두 가지의 접종방법 중 근육을 통한 면역방법이 피 하를 통한 면역방법에 비해 강한 면역반응을 유도하는 것으로 확인되었다. 결론 : 본 실험을 통하여 백시니아 바이러스의 세포배양체계를 확립하였으며 마우스 모델에서 바이러스의 면역원성을 확인하였다. 이러한 체계를 통하여 증식된 백시니아 바이러스를 이용하여 천연두 바이러스의 진단법 개발 및 치료백신의 개발을 위한 기반을 제공할 수 있을 것으로 기대된다.

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