장출혈성대장균의 진단제 개발에 관한 연구 (Ⅱ)

초록

목적 : 전국의 주요 종합병원을 선정하여 설사환자 가검물을 채취하고 장출혈성 대장균 감염 의사환자에 대한 대장균 0157 분리동정을 실시하여 국내 감염 실태를 파악하고 장출혈성 대장균 혈청형 진단용 제제의 국산화 개발을 위한 기초 시험 연구를 수행하고자 함 방법 : 1. 전국 l2개 주요 병원을 선정, 설사환자 가검물을 채취하여 대장균 O157, O26, O111등 장출혈성 대장균 확인 동정 실시. 2. EHEC 혈청군 진단용 항혈청 생산에 적합한 균주를 국내 유행 가능성 및 면역원성을 고려하여 탐색 선별 하였다. 선정된 균주로 면역용 항원을 제조하고 가토에 면역하여 혈청을 생산하였다. 제조된 조혈청을 교차응집성 균주로 흡수하여 교차응집소를 제거하여 각각의 특이 O-항혈청을 제조하였다. 장출혈성 대장균의 특이적 베로 독소를 생산하는 균주 탐색을 위한 항베로독소 혈청을 제조하기 위하여 베로독소 항원의 정제 및 관련 유전자 cloning을 실시하였다. 결과 : 1. EHEC균 국내 감염환자에 대한 실험실 감시. 설사환자 가검물 5,689건 중 양성 1예 확인(0157:H7, VT type Ⅰ) 2. 혈청군 특이진단용항혈청 시험 생산( E.coli O157, 026, O111, O25, O55, O103, O104, O145, O1, O5, O6, O8, O15, O53) 3. V erotoxin Ⅰ gene cloning 4. 베로톡신 진단제 개발을 위한 참조용 항베로톡신 Ⅰ,Ⅱ 단클론항체 시험 생산 결론 : 1. O-혈청군 진단용 항혈청의 시험 생산 및 활용 1) O157 시도 보건환경 연구원, 국립검역소, 보건소에 배정, 활용 2) O26, O111 - 시도 보건환경연구원, 국립검역소에 배정, 활용 2. 생산된 E.coli O25 O55등 14종에 대한 O- 혈청형 분류시험에 활용 3. 효율적인 VT정제 기술 및 항VT 혈청 생산 기초 기술고안 연구

키워드