Studies on the effects of LIF on muscle and nerve regeneration

초록

목적 : 근세포의 성장을 촉진하고, 신경세포의 중요한 생존인자로 알려져 있는 LIF (leukemia inhibory factor)가 근세포의 성장과 분화에 미치는 효과를 검토하고, 이를 기초로 하여 근·신경재생에 미치는 영향을 평가하고 한다. 방법 : 본 연구에서 근세포의 분화정도는 myosin heavy chain (MHC)의 단백질 발현양과 muscle creatine kinase (MCK)의 전사수준 그리고 현미경하에서 myotubes의 수를 세어 비교하였음. LIF에 의해서 활성화되는 신호전달 기전을 규명하기 위해서는 인산화된 ERK나 STATs 특이적인 항체를 이용하여 western blotting을 수행하였으며, 전사수준의 비교를 위해서는 MCK-Luc vector를 transient transfection시킨 다음 Luciferase activity를 측정하여 비교하였다. 그리고, 본 연구에서는 Ad-LIF를 감염시킨 NIH3T3 세포주의 배양액을 이용하여 LIF의 glycosylation이 활성에 미치는 영향을 비교 평가하였다. 결과 : 1)LIF는 glycosylation에 관계없이 근육아세포인 C2C12 세포주의 분화를 억제하였으며, 2) LIF는 C2C12 세포주에 처리하였을 때 ERK와 STAT3 signal pathways를 활성화시키는데, 그 중 MEk-1/2의 특이적인 저해제인 U0126 처리와 dominant-negative mutant의 co-trasfection이 LIF에 의한 근분화억제가 reversion되어 ERK의 활성화가 분화억제 기전에 관여한다는 것을 확인하였다. 3) LIF에 의한 근세포분화억제효과는 분화유도 후 24시간 이전에 처리되었을 때만 효과를 나타내는 time window가 있음을 확인하였다. 결론 : LIF는 glycosylation에 관계없이 근육아세포인 C2C12 세포주의 분화를 억제한다.

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