국내분리 다제내성 Acinetobacter baumannii의 내성기전 및 내성관여 efflux transport system의 분석

초록

목적 : 국내 다제내성 Acinetobacter baumannii의 다제내성 원인 분석이 미흡함에 따라 국내 1·2차 의료기관으로부터 분리된 임상분리주에 대하여 내성 유전자 분석과 Efflux pump inhibitors 영향 평가 조사 등을 수행해 그 내성원인을 분석하고자 한다. 방법 : A. baumannii의 주요 내성유전자와 efflux pump 유전자 그리고 outer membrane protein의 유전자와 quinolone 계열 항균제 내성에 관여하는 gyrA, gyrB, parC를 대상으로 PCR과 염기서열을 확인하였다. Resistance island 삽입여부와 내성유전자의 clustering을 확인하기 위해 Southern-PFGE를 수행하였다. Integrase I 유전자에 대해서도 함께 실험함으로써 ATPase내 삽입여부 및 Integron 여부도 확인하였다. 희석법을 이용해 5가지 EPI(PAβN, CCCP, reserpine, NMP, Verapamil)에 따른 항균제 내성형질의 변화를 관찰하였다. 결과 : 2004년-2006년도까지 1·2차 의료기관으로부터 수집된 A. baumannii 총 315주 중 253주(80.3%)가 3제 이상의 항균제에 내성을 나타내었으며, 그중 다제내성 혈액분리주 6주와 감수성 혈액분리주 1주를 대상으로 내성유전자 분석을 수행하였다. Aminoglycoside 계열의 항균제에 내성을 지닌 모든 균주는 phosphotransferase인 aphA1, aadDA1, sul1, strA 등의 내성 유전자를 포함하고 있었으며, β-lactam 계열의 내성원인인 SHV형과 VEB형 bla유전자가 검출되었다. A. baumannii 혈액분리주의 gyrA, gyrB, parC 유전자 내 QRDR 염기서열을 분석한 결과, gyrB 유전자 내 돌연변이는 확인되지 않았으며, gyrA와 parC 유전자 내 주요 돌연변이는 Ser83→Leu로 모든 ciprofloxacin 내성·중간내성 주에서 확인되었다. PFGE-southern blot 수행 결과, strA 유전자는 ATPase 유전자와 인접해 있으며, IntI-aacA4-aadA1-aadDA1-aphA1-sul1구성과 IntI-aacA4-aadA1-aadDA1-sul1구성의mobile element 등 두 가지 Integron이 나타났다. Efflux pump의 내성형질에 미치는 영향 은 Macrolides 계열인 azithromycin과 erithromycm과 chlorampenicol에서 PAbN을 처 리 하였을 때 항생제 내성이 감소하는 경향을 보여 주어 이들 균주의 내성 형질에는 efflux pump가 관여되어 있을 것으로 판단된다. 결론 : 국내 분리 내성균주의 efflux pump에 의한 내성정도는 크지 않았지만 대부분의 균주에서 항균제의 효과를 떨어뜨림이 확인되었으며, 이는 다제 내성형질을 획득하는데 큰 역할을 했을 것으로 보여진다. 이들 균주에 대해 국내 다제내성 균주의 내성형질에 관여된 efflux pump와 그 억제기전에 대해 보다 심도 있는 연구가 필요할 것으로 사료되었다.

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