Bacillus brevis에서 탄저균의 방어항원의 정제

초록

목적 : 본 연구는 Bacillus anthracis sterne주의 방어항원 유전자를 삽입한 pNU212-mPA 백터를 가지고 있는 Bacillus brevis 47-5Q의 배양액에서 재조합 방어항원의 대량 생산 기술을 개발했다. 방법 : 재조합 방어항원 단백질은 20-L 발효기를 통해서 배양을 하고, 이온교환 크로마토그라피 방법과 소수성 크로마토그라피 방법, 한외여과법 , 그리고 하이드록시아파타이트 크로마토그라피 방법을 이용해서 정제를 하였다. 재조합 방어항원의 순도는 HPLC를 이용하여 확인하였다. 결과 : 정제된 재조합 방어항원 단백질의 순도는 99% 이상 이었으며, 최종 생물학적 활성도가 확인된 방어항원의 생산율은 리터당 60㎎이었고, 20-L scale에서의 재조합 방어 항원은 약 1.2g이 확보되었다. 결론 : B. brevis pNU212-mPA의 배양액에서 생물학적 활성을 보이는 재조합 방어항원을 대량 확보하는 기술을 완료하였으며, 이를 통해 탄저에 대한 매우 효과적인 재조합 탄저백신의 개발이 가능케 될 것으로 기대된다.

키워드