사스코로나바이러스 nucleocapsid DNA 백신개발

초록

목적 : 본 연구에서는 사스코로나바이러스 nucleocapsid DNA(SARS-N DNA)의 면역반응 유도 작용과, 이 SARS-N DNA가 사스코로나바이러스 감염증의 예방을 위한 백신으로서의 응용 가능성을 마우스 실험모델에서 검토하였다. 방법 : SARS-N DNA의 면역원성을 확인하기 위한 실험은 마우스에 SARS-N DNA을 2주 간격으로 2회 근육주사한 후, 혈청 중의 특이 항체가를 ELISAS 의해 측정하여 체액성 면역의 유도활성을 관찰하였다. 세포성 면역유도 작용은 면역 마우스의 비장세포를 회수하여, invitro에서 항원 단백질로 자극한 후, 면역세포의 증식작용과 사이토카인 유도를 측정하였다. 또한 2차 면역 후 1주째의 마우스에 항원 단백질을 피하주사한 후 형성되는 swelling반응을 통해 지연형 과민반응을 측정하였다. 결과 : SARS-N DNA의 면역에 의한 항체반응 유도를 측정한 결과, SARS-N DNA는 투여량에 의존적으로 특이항체를 유도하는 것으로 밝혀졌다. 또한 SARS-N DNA의 면역에 의해 사스바이러스 nucleocapsid단백질에 대한 T세포 증식반응과 항원특이적인 사이토카인 분비 및 지연형 과민반응(DTH; delayed-type hypersensitivity)도 투여량에 의존하여 유도되었다. 하지만 SARS-N DNA를 경비내(intranasal)투여하였을 경우에는, 항원 특이적인 면역반응은 유도되지 않았다. 한편 본 연구에서는 SARS-N DNA의 면역원성을 상승시킬 수 있는 adjuvant를 탐색하기 위한 목적으로, 이미 단백질 항원에 대한 면역증강 활성이 알려져 있는 한국산 겨우살이 랙틴(Korean mistletoe lectin; KML-C)을 이용하여 SARS-N DNA에 대한 adjuvant효과를 측정하였다. KML-C를 SARS-N DNA와 함께 면역하였을 때, KML-C는 사스바이러스 nucleocapsid단백질에 대한 항체반응을 상승시켰으며, 특히 IgG1, IgG2a 및 IgG2b isotype의 현저한 증가가 관찰되었다. 또한 KML-C는 SARS-N DNA에 의해 유도되는 사스바이러스 nucleocapsid단백질에 대한 T세포 증식반응과 사이토카인 분비, 지연형 과민반응을 모두 상승시키는 세포성 면역반응 상승효과도 관찰되었다. 결론 : 이상의 결과로부터 SARS-N DNA는 사스코로나 바이러스 nucleocapsid단백질에 대한 면역반응을 유도하는 백신후보로서 가능성이 있으며, KML-C는 이 SARS-N DNA에 대한 adjuvant효과를 가지는 것으로 확인되었다.

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