장내바이러스성 질환의 신속한 진단을 위한 분자유전학적 진단체계 개발

초록

목적 : 장내바이러스에 감염된 무균성 수막염 환자 등 장내바이러스성 질환자의 치료에 실제 이용할 수 있는 신속한 분자유전학적 진단법 개발을 위하여 장내바이러스의 비구조 유전자(Non coding region ; NCR)부위의 제한효소 절편 다형성(Restriction fragment length polymorphism ; RFLP)을 분석하여 현재까지 알려진 진단방법의 문제점인 진단의 효용가치 문제를 해결할 수 있는 가능성을 확인하였다. 방법 : 세포배양법으로 분리된 여러 가지 장내바이러스의 RNA를 분리하여 RT-PCR을 수행하고 PCR-directed seauencing을 통하여 염기서열을 분석하였으며, RFLP를 나타내는 효소 인식부위를 결정하였고 Blind test를 위하여 제한효소 처리를 통한 장내바이러스 typing을 실시하였다. 결과 : PCR-directed sequencing 결과를 바탕으로 장내바이러스 NCR의 일부(436bp) 염기서열 중 특정 제한효소에 의해 인식되는 부위를 확인하였다. Coxsackie B1, B3, B5, Echo 30의 겨우 232위치에 Nci Ⅰ 인식부위가 없는 반면 Echo 7, 9, Coxsackie B2등의 바이러스에는 Nci Ⅰ 인식부위가 존재하였다. CB1, Echo 30에만 Aos Ⅰ에 의하여 인식되는 부위가 273위치에 존재하여 CB3, CB5와의 구분이 가능하였다. 이들중 Echo 30은 또한 Rsa Ⅰ에 의해 인식되는 부위가 있는 것을 확인하여 CB1과의 구분도 가능하게 하였다. CB3의 287위치에는 특이적으로 Esp Ⅰ 인식부위가 있어서 구분이 가능하였다. 결론 : 이상의 결과를 이용하여 1993년도부터 우리나라에서 분리된 장내바이러스 중 Echo 7, 9, 30, CB1, 2, 3, 5 등의 바이러스를 분자유전학적인 방법으로 동정할 수 있었으며, PCR을 이용한 신속한 진단방법으로 확립된 이 결과는 현행 장내바이러스성 질환의 진단(중화항체법을 이용한 동정)이 치료에 전혀 도움이 안된다는 문제점을 극복할 수 있을 것으로 생각된다.

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