국내 삼일열 말라리아의 전파 차단 물질 탐색에 의한 백신후보물질 연구

초록

목적 : 삼일열 말라리아에 특이하게 작용할 수 있는 전파 차단 후보물질을 탐색 및 개발 연구하고 이 물질에 대한 유용성을 평가하였다. 방법 : 삼일열 말라리아의 전파차단 물질을 PCR법을 이용하여 클로닝하고 유전자의 염기서열을 분석하였다. 이를 protein expression vector을 이용하여 대장균에서 발현‧정제하여 이들에 대한 항체반응을 말라리아 유행지와 비유행지 주민을 대상으로 ELISA법으로 분석하여 항원성을 평가하였다. 또 이들에 대한 단클론항체를 제작하여 모기체내에서 말라리아 oocyst의 형성여부를 파악하고, 웅성 및 자성배우체의 접합체 형성 방해 정도를 평가하였다. 결과 : 삼일열 말라리아 환자에서 분리한 원충 genome DNA로부터 전파차단 유전자를 탐색하기 위하여 PCR법을 이용한 결과 Pv25의 경우는 660 bp이었고 Pv28은 726 bp이었으며, 여기서 연역된 아미노산 염기서열은 Pv25는 219, Pv28은 241로 나타났다. 형질 전환된 세포에서 얻은 발현된 단백질은 gradient SDS-PAGE(7.5-15%)로 분석결과 Pv25는 대략 25 kDa이고 Pv28은 28 kDa이었다. ELISA 분석결과 2xNM일 때 Pv25는 11% 그리고 Pv28은 27%가 양성인 것으로 보아 미약하나마 항원성이 있는 것으로 판단되었다. 유용성평가에 있어 모기에서의 말라리아 생활사가 차단되는 것으로 확인되었다. 결론 : 백신후보물질인 transmission blocking antigen Pv25와 Pv28의 ookinete surface protein은 말라리아의 생활사를 차단할 수 있는 중요한 물질임을 알 수 있었고, 국내의 삼일열말라리아에서 Pv25보다 Pv28의 표면 단백질이 보다 효과적임을 알 수 있었다.

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