HB-EGF의 혈관 평활근 세포 증식에 대한 기전 연구

초록

목적 : HB-EGF는 EGF 수용체에 결합하여 활성화시키는 EGF family 중 하나이며, HB-EGF는 PI3K-Akt 와 MAPK 기전을 통해 평활근세포의 증식을 유도한다고 알려져 있다. 본 연구에서는 HB-EGF에 의한 평활근세포의 증식에 JAK-STAT pathway가 관여됨을 밝히고, 그에 따른 delayed STAT3 활성화의 기전을 알아보고자 하였다. 방법 : 혈관평활근세포는 백서 대동맥에서 분리하여 사용하였으며, 세포증식은 BrdU incorporation assay, 세포내 신호전달기전은 western blot을 통해 증명하였다. IL-6 사이토카인 유전자발현 변화는 RT-PCR로 확인하였으며, 배양액으로의 IL-6 사이토카인 분비는 ELISA kit을 이용하였다. 결과 : 혈관평활근세포에서 HB-EGF (10ng/ml)는 biphasic하게 STAT3를 활성화시킨다. (5분과 60-120분). STAT3 활성화는 IL-6 사이토카인에 의해 조절된다고 보고된바 있으므로 IL-6 사이토카인의 유전자 발현을 RT-PCR로 확인하였다. 혈관평활근세포에서 HB-EGF에 의해 IL-6, CT-1, LIF가 증가되었고 배양액내로 분비된 IL-6도 역시 증가되었다. HB-EGF에 의한 IL-6 사이토카인 유전자 발현 증가나 분비는 NF-κB inhibitor인 Bay 117082에 의해 억제되었다. HB-EGF에 의한 delayed STAT3 활성화는 Bay 117082 와 IL-6 neutralizing 항체에 의해 억제되었으며, HB-EGF에 의한 혈관평활근세포의 증식이 IL-6 neutralizing 항체에 의해 억제되었다. 결론 : 이상의 결과는 HB-EGF에 의한 혈관평활근세포 증식의 여러 기전 중에 NF-κB를 통한 IL-6 분비에 의해 delayed STAT3 활성화가 한 기전이 될 수 있음을 시사한다.

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