국내 감염성 질환 병원체의 성상분석을 통한 표준 실험실 체계 구축 (Ⅱ) : 우리나라 AIDS reagent 프로그램 개발 및 국내 HIV/AIDS 물질 자원화

초록

목적 : 우리나라에 유행하는 HIV-1 subtype B의 full length molecular clone을 제작함으로써 국내 HIV-1 표준주의 reference reagent를 마련하고자 하였다. 방법 : HIV-1 env 유전자의 염기서열에 근거하여 Korean B cluster에 속하면서 낸국인과의 성접촉에 의해 감염된 4명을 대상군으로 선정하였다. HIV-1 full length clone을 제작하기 위하여 이들 대상자의 배양된 PBMCs로부터 DNA를 분리한 후, 9kb와 700bp가 중첩된 5kb의 두 가지 산물을 얻을 수 있는 long PCR를 실시하고 cloning하였다. 결과 : KR7115, KR5015, KR5028 3명의 감염자로부터 HIV-1 near full length인 약 9kb PCR product가 삽입된 다수의 clone을 확보하였고 EcoRI 효소처리 및 env, pol 유전자 부위 PCR에 의해 clone의 HIV 특이성을 확인하였다. KR3008로부터는 두 개의 5kb PCR 산물을 증폭하여 5´부위 5kb의 4개의 clone을 얻었다. 결론 : 국내 특이적인 HIV-1 subtype B의 9kb full length clone을 확보하였으며 앞으로 자기복제가 가능한 감염성 clone 제작이 성공한다면 국내 HIV 연구의 reference reagent로 사용될 수 있으며, 국내 HIV 연구자에게 공급될 경우 HIV 백신개발, 면역학적 연구에 귀중한 재료로 사용될 수 있을 것이다.

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