장내 바이러스 분리 동정 및 단클론 항체의 항원 인식 능력에 관한 연구

초록

목적 : 장내바이러스에 존재하는 공통항원을 면역원으로 이용하여 단클론 공통항체를 제작하고 이를 이용 하여 항체의 역가 및 장내바이러스 항원 인식능력을 분석하고 항체의 특성을 분석함으로써 광범위한 장내바이러스 진단에 사용될 수 있는 항체를 확보하고자 하였다. 방법 : 공통항원으로 제조된 단 클론 항체를 제조하기 위하여 원핵세포에서 발현된 공통항원을 마우스에 복강 면역한 후 마우스의 항체생성 여부를 관찰하였다. 항체의 생성이 확인된 마우스의 비장을 적출하여 림프구를 분리한 후 myeloma 세포와 세포융합을 하고 융합된 세포를 선별하였다. 융합된 세포에서 생산되는 단클론 또는 다클론 공통항체가 가지는 항원 식별능력을 확인하기 위하여 국내에서 분리된 바이러스주를 포함하여 주요한 뇌수막염 원인 바이러스 및 환자로부터 채취한 가검물을 확보한 후 이를 이용하여 ELISA, Western blotting등의 면역학적 실험을 수행하였다. 결과 : 장내바이러스 공통항원을 인식할 수 있는 단 클론 항체를 생산하는 24개의 융합세포 클론을 확보 하였다. 공통항원에 강한 면역성을 보이는 4개의 클론을 선택하여 항체 특성을 분석한 결과 IgG1형으로 나타났다. 이들 단 클론항체의 장내바이러스 인식능력은 15주의 국내분리 장내바이러스를 항원으로 하는 면역형광항체 법을 통하여 확인 할 수 있었다. 결론 :본 연구에서 제작한 단클론항체는 광범위한 장내바이러스를 인식할 수 있는 항원인식능력을 가졌음을 확인하였으며, 이러한 공통항체를 이용하여 여러 가지 장내바이러스를 신속하게 진단할 수 있는 신속진단법을 개발할 수 있는 중요한 연구자료로 사용될 수 있을 것이다.

키워드