HIV 초기감염자에서의 HIV-1 env 유전자 변이와 중화항체 반응과의 상관성 연구 : HIV-1 Korean clade B 유래의 HIV-1 pseudovirus 특성

초록

목적 : 다양한 HIV 바이러스형에 대하여 넓은 범위의 중화항체 반응을 유도하는 것은 HIV-1 백신 개발을 위한 중요한 목표이며, 이러한 항체반응을 측정할 수 있는 표준화된 중화항체반응 측정법이 필요하다. 최근 HIV의 전파과정에서 특징적인 중화항체능에 대해 보고되고 있으며, 각각 아형과 감염경로에 따라 다양한 결과들을 나타내고 있다. 따라서 본 연구는 독특한 HIV-1 Korean subtype B clade를 이루고 있는 국내 HIV-1 감염자 유래의 슈도바이러스(Pseudovirus)를 만들고 이를 이용하여 한국인 감염자들에서 나타나는 중화항체 반응과 HIV-1 유전자 변이와의 연관성을 규명하고자 하였다. 방법 : 국내 HIV-1 감염자 중 subtype B clade에 속하는 HIV-1 감염자의 혈액으로부터 PBMC를 얻어, genomic DNA를 분리하였다. 이로부터 HIV-1 gp160에 해당하는 약 3 kb의 DNA를 증폭시킨 후, pcDNA3.1 His/TOPO vector를 이용하여 HIV-1 env 발현 클론을 제작하였다. 이를 env 유전자가 결여된 pSG3△env 벡터와 함께 cotranfection하여 슈도바이러스를 형성하였다. 형성된 슈도바이러스는 TZM-bl에 감염시켜, 중화항체 활성을 측정하였다. 결과 : 계통학적 분석결과에 따라 HIV-1 subtype B에 감염된 10명의 HIV-1 한국인 감염자를 선정하였다. 이 중 6명의 대상군에서 HIV-1 env 슈도바이러스를 형성하였으며, 이들은 평균 7.97×10³(range, 6×l0²~3.2×l0⁴) IFU/ml의 역가를 나타내었다. 6명의 대상군 중 4명은 Korean clade B였고, 2명은 non-Korean clade B에 속하였으며, 이들에 대한 자가(Autologous) 및 타가(Heterologous) 항체에 대한 중화항체가 측정 결과 non-Korean clade B보다 Korean clade B에서 타가 항체 반응이 상대적으로 광범위하게 작용하였다. 결론 : HIV-1 Korean clade B env 유전자를 지닌 슈도바이러스를 형성하고 그 특성에 대하여 알아보았다. 이 reference reagent들은 국내에 유행하는 HIV-1 바이러스에 대한 중화 항체의 측정에 이용될 수 있을 것이다. 본 연구를 통해 정립된 방법을 이용하여 숙주의 중화항체에 대한 바이러스의 면역회피 변이체 생성 현상을 파악하여 HIV가 숙주의 면역반응으로부터의 회피하는 기전을 연구하고자 한다.

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