Francisella tularensis 감염증 진단표준화 및 면역기전 연구

초록

목적 : F. tularensis 감염 시 숙주세포 방어기전 연구를 위해 참조균주(LVS)와 국내 분리주(Pohang)를 murine marophage cell line J774A.1 세포주에 감염시켜 두 균주간의 균 탐식능을 알아보고자 하였으며, 감염세포에서의 cytokine, NO 생성 및 변화량 측정으로 F. tularensis의 세포성면역관련 자료를 확보하고자 하였다. 방법 : 병원성 측정, 탐식능 등을 알아보기 위하여, 20 MOI(multiplicity of infection)의 LVS주와 Pohang주는 2x10⁶의 세포주에 감염 후 3시간, 6시간, 24시간, 48시간, 72시간에 따른 탐식능을 비교하였으며, 초기면역에 관여하는 cytokine(TNF-α, INF-γ, IL-2, IL-4, IL-10, IL-12)및 No의 분비량을 ELISA법으로 측정하여 비교분석하였다. 결과 : J774A.1의 1x10⁶세포에 LVS주 및 Pohang주를 20 MOI로 감염시킨 후, 시간에 따른 감염양상은 3시간부터 세포벽을 통해 세포질에 균주가 관찰되었으며 24시간에서는 많은 균수가 세포질에서 관찰되었으며, 성장능은 두 균주가 비슷하였다. LVS 및 Pohang주로 3시간 동안 감염시킨 세포주에서 회수된 균수는 각각 1x10⁶ CFU이었으며, 72시간 배양 시 감염세포주에서 회수된 균수는 1x10⁶ CFU로 증가된 탐식능을 나타내었다. 감염세포에서의 IFN-γ의 생성량은 두 균주 모두 지속적으로 증가하여 72시간에는 LVS가 2 ㎍/㎖, Pohang 주가 2.8 ㎍/㎖으로 측정되어 Th1 세포의 활성을 확인하였다. IL-12의 생성량은 72시간에 LVS주의 약 80 ㎍/㎖보다 Pohang주가 150 ㎍/㎖로 2배 높게 나타났다. IL-12가 감염 초기 IFN-γ 생성량에 주요하게 작용하는 것을 두 균주간의 IL-12 생성량에 따라 비례적으로 IFN-γ가 생성됨을 확인할 수 있었다. Th2 세포의 활성과 관련된 TNF-α, IL-2, L-10, IL-4는 시간에 관계없이 모두 200 ㎍/㎖이하로 대조군과 차이를 나타나지 않았다. NO₂- 생성은 두 균주가 유사한 량 4 ㎍/㎖(24시간), 6 ㎍/㎖(72시간)으로 측정되었다. 이는 IFN-γ로 활성화된 감염세포주가 항-LVS 및 항-분리주 활성과 연관될 것으로 사료된다. 결론 : F. tularensis LVS 및 Pohang분리주의 J774A.1 세포성 초기 면역기전에서 IL-12, IFN-γ, NO이 중요한 기능을 할 것으로 사료된다.

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