PPARδ-/- 형질전환 생쥐를 이용한 동맥경화관련 신규유전자 발굴

초록

목적 : Nuclear hormone receptor family인 PPARδ는 주로 지질 및 글루코스 대사에 관여하는 것으로 보고되었다. 본 연구에서는 PPARδ 리간드인 L-165041이 혈관평활근세포의 증식과 이동에 미치는 영향과 그 기전을 알아보고 나아가 LDLR-/-동물동맥경화모델에서 PPARδ가 지질농도의 변화에 효과가 있는지 알아보고자 하였다. 방법 : PPARδ 리간드로는 L-165041을 이용하였고 혈관평활근세포증식은 BrdU incorporation assay, 세포이동은 wound healing assay, 세포주기관련 단백질 변화는 western blot으로 확인하였으며 동맥경화 실험동물모델로서 LDLR-/-마우스를 이용하였다. 동물실험은 각 군당 10마리를 대상으로 고콜레스테롤 식이와 동시에 L-165041 리간드를 5㎎/㎏/day 용량으로 8주간 투여하였으며 2주일 단위로 체중 및 혈액 내 지질 변화를 분석하였다. 결과 : PPARδ 리간드 L-165041은 PDGF에 의한 혈관평활근세포의 증식 및 이동을 유의하게 감소시켰고, 세포주기 분석결과 L-165041 전처리 군에서 S phase가 현저하게 감소되었다. L-165041 전처리는 PDGF에 의해 유도된 Rb의 인산화를 유의하게 감소시켰으며 이와 더불어 세포주기 관련 단백질인 cyclinD1과 CDK4 발현 역시 유의하게 감소시켰다. LDLR-/- 동맥경화마우스 모델을 이용한 실험 결과, LDLR-/- 마우스에서 대조군과 실험군간의 유의한 체중변화는 없었으며 지질의 경우 L-165041 투여군에서 통계적으로 유의하지는 않지만 총콜레스테롤 농도, 중성지방 및 LDL 농도가 감소하였다. 결론 : 이상의 결과에서 PPARδ리간드 L-165041에 의한 혈관평활근세포의 증식 및 이동에 대한 억제효과는 부분적으로 Rb 인산화의 감소를 통한 세포주기 관련 단백질 발현의 감소와 관련되어 있음을 확인하였으며 L-165041은 LDLR-/- 동맥경화모델에서 지질감소 효과가 있는 것으로 밝혀졌다.

키워드