Multiplex PCR에 의한 호흡기 아데노바이러스의 진단 및 아형 분석

초록

목적 : 아데노바이러스는 49개의 혈청형이 알려져 있으며, 이 중에서 호흡기질환을 유발시키는 아데노바이러스는 B, C와 E 아형에 속하며, 각 아형에 따라 그 임상증상도 다양한 것으로 알려져 있다. 또한 아데노바이러스 감염증은 호흡기성 세균뿐만 아니라, 인플루엔자, 파라인플루엔자와 respiratory syncytial virus(RSV) 에 의한 감염증과 임상증상으로 구분이 어렵다. 아데노바이러스를 진단하는 방법으로써 세포배양 및 간접항원 진단법은 판정결과를 얻는데 시간이 많이 소요되며, 항체 교차반응의 단점이 있었다. 이에 기타 호흡기성 병원체와 아데노바이러스를 구분진단하고, 각 아형을 구분할 수 있는 신속 진단을 위해 Multiplex PCR을 개발하였다. 방법 : 호흡기 아데노바이러스 각 형에 특이적인 primer를 제작하고, 아데노바이러스 표준주 및 국내 분리주를 이용해서 Multiplex PCR법을 확립하였다. 다른 세균성 호흡기 병원체와의 교차반응 유무를 확인하였으며, 기존의 형특이 항체를 이용한 진단결과와 비교하였다. 결과 : 아데노바이러스의 6종의 혈청형에 대한 특이적인 PCR 증폭산물을 agarose 전기영동상에서 관찰할 수 있었으며, 호흡기 아데노바이러스와 유사한 임상증상을 보이는 인플루엔자, 파라인플루엔자, RSV, CWcynydia pneumoniae, Streptococus pneumoniae, Haemophilus influenzae와 Mycoplasma pneumoniae에서 교차반응하지 않는 것을 확인하였다. 그리고, 형특이 항체를 이용해서 분리된 결과와 Multiplex PCR의 결과가 일치하였다. 결론 : 본 연구에서 개발된 아데노바이러스 Multiplex PCR법은 각 혈청형을 동시에 구분, 진단할 수 있으며, 호흡기 아데노바이러스 각 혈청형에 대한 유행양상의 연구와 신속한 진단에 매우 유용하게 이용될 수 있을 것이다.

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