숙주내 HIV reservoir 제거를 위한 HIV 만성감염기전연구

초록

목적 : 숙주내 HIV잠복감염은 HIV바이러스 재활성화와 HAART치료 중단에 의한 바이러스량의 급증에 주요 요인이다. 그러므로, 효과적인 HIV 치료제 및 치료백신개발을 위하여 HIV바이러스가 숙주내에서 어떻게 잠복감염상태를 유지하는지에 대한 만성감염기전을 규명하고자하며, 이를 위하여 우선적으로 HIV가 만성적으로 감염된 여러 종류의 세포주를 제조·확립하고자 하였다. 방법 : Jurkat 세포 및 A3.01세포에 HIV표준주를 감염시킨 후 limiting dilution cloning 방법에 의하여 잠재적인 HIV만성감염세포주를 제조하였으며, HIVDNA 유전자검출법, modified inverse PCR에 의한 HIV 삽입부위분석, TPA재활성화시험 및 바이러스재감염시험 등에 의하여 HIV만성감염세포주를 스크리닝하고 이들의 분자생물학적인 특성을 조사하였다. 결과 : 기존에 Jurakt세포를 사용하여 만든 17종류의 CLICj 세포클론에 대하여 HIV 삽입부위를 조사 분석한 결과 한개의 HIV provirus가 삽입된 CLICj 세포수는 11개, 두개의 HIV provirus가 삽입된 CLICj 세포수는 4개, 세개의 HIV provirus가 삽입된 CLICj 세포수는 2개로 밝혀졌다. A3.01세포를 사용하여 570개의 잠재적인 만성감염주세포를 제조하였으며, 이들 중 단지 3개클론(NCHA-1, 2, 3)에서만 HIVDNA와 p24항원이 검출되었다. NCHA 세포클론은 TPA자극에 의한 HIV재활성화시험에서 p24바이러스 항원이 시간이 경과함에 따라 증가하여 intact HIV 바이러스가 재활성에 의해 생성됨을 확인하였으며, 또한, 이들 클론으로부터 생성된 HIV바이러스는 정상세포에 재감염시 서로 다른 감염력을 보임을 알 수 있었다. 결론 : 상기와 같이 다양한 분자생물학적인 특성분석 결과 A3.01세포에서 유래된 NCHA 세포클론은 완전히 서로 다른 만성세포주임이 확인되었다.

키워드