탄저 독소에 의한 사람 면역세포 반응 및 면역 기전 연구

초록

목적 : 본 연구에서는 탄저균의 중요한 병원성 인자인 탄저독소에 대한 세포면역반응을 확인하기 위해 사람 단핵구 세포에서 분화 유도한 수지상세포에 탄저 독소를 직접 처리하여 수지상세포에서 나타나는 사이토카인 반응과 MAP kinase 신호전달체계를 확인하고 숙주 면역체계에 대한 탄저독소의 역할을 규명하고 이들의 면역기전을 밝히고자 하였다. 방법 : 수지상세포는 사람 적혈구 농축액으로부터 단핵구 세포를 분리하여 GM-CSF와 IL-4가 포함된 배지에서 6일간 배양하여 분화 유도하였으며 수지상세포의 확인시험은 다양한 표면 마커의 발현량과 dextran 포식정도를 유세포분석기를 이용하여 확인하였다. 수지상세포에 PA, LF 그리고 PA와 LF를 같이 6시간동안 처리한 후 다시 30분간 LPS를 처리하여 수지상세포의 증식 측정하였다. 또한 이때의 MAP kinase 인산화 정도를 p38, ERK, JNK 등의 항체를 이용하여 western blot을 통해 확인하였다. 결과 : 단핵구 세포에서 분화시킨 수지상 세포의 표면항원을 분석하였을 때 CD1a, CD11c, CD40, CD80, CD83, CD86, HLA-DR 등 수지상세포에 특이적인 표면항원의 발현이 증가하는 것을 확인하였고 dextran-FITC의 포식능이 감소함으로서 수지상세포의 성숙도를 확인할 수 있었다. 탄저독소를 처리한 후 LPS로 재자극한 수지상세포에서는 CD40, CD80, CD83, CD86, HLA-DR 등의 발현이 탄저독소를 처리하지 않은 수지상세포에서보다 현격하게 감소하였으며 IL-6, IL-10, IL-12, TNF-α 등 사이토카인의 발현도 상당히 감소하는 것을 확인하였다. 또한 탄저 독소가 처리된 지 30분후에 p38, ERK, JNK 등 전체적인 MAP kinase 인산화가 감소하는 것을 확인하였다. 결론 : 이와 같은 결과로서 탄저독소가 사람 단핵구 유래 수지상세포의 선천성 면역반응을 손상시키고 세포내 MAP kinase 신호 전달 체계를 파괴함으로서 사이토카인의 분비를 차단하고 숙주 면역세포반응을 손상시키는 것을 확인하였다.

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