Azole계 내성 Candida균의 내성기전 및 분자유전학적 특성 연구

초록

목적 : 국내 염상에서 분리되는 칸디다 균주를 대상으로 항진균제 내성 양상을 파악하고 분자유전학적 형별을 분석하여 내성과의 연관성을 조사하며 azole계 항진균제 내성 관련 유전자에 관한 특성 및 기능 분석으로 국내 azole계 항진균제에 대한 내성기전을 분석하고자 함. 방법 : 임상에서 분리된 Candida 166 균주를 수집하였으며 일부 균주를 대상으로 분자유전학적 형별 분석법으로 PFGE, RAPD, RFLP법을 사용하였다. 항진균제 감수성 검사를 위한 항진균제제로 amphotericin B, 5-flucytosine, fluconazole, voriconazole을 사용하였고 감수성 시험법으로는 미량 액체 희석법(NCCLS)과 E-test 방법을 사용하여 48시간 배양한 균의 MIC를 판정하였다. 결과 : 분리 동정된 Candida 166 균주의 균종별 분포는 C. albicans 89주(53.6%), C. parapsilosis 25주(15%), C. tropicalis 23주(13.8%), C. glabrata 18주(10.8%), 기타 균주 14 균주가 분리 동정 되었다. 항진균제제 감수성 시험 결과 amphotericin B에 대해서는 모든 균주가 감수성을 보였으며 5-flucytosine에 대 해 C. albicans 3균주가 내성을 보였고 fluconazole에 대해서는 거의 모든 균주가 감수성을 나타냈으나 C. krusei 3균주 C. glabrata 2균주가 내성을 나타내었고 C. glabrata 4균주가 용량 의존성 감수성 MIC를 나타내었다. 한편 fluconazole 이외 Azole계 항진균제로 사용되는 voriconazole에 대한 균의 약제 감수성은 fluconazole 약제에 비해 약 2단계 정도 낮은 MIC를 나타내었다. 분리된 Candida균종 중 일부 균주를 대상으로 실시한 PFGE의 결과로는 C. albicans 6가지, C. parapsilosis 3가지, C. glabrata 8가지 종류의 PFGE 형별을 각각 나타내었다. RAPD 분석 으로 C. albicans는 총 9개의 type으로, C. parapsilosis 4 type, C. glabrata 2 type이 관찰되었다. 분리된 염색체 DNA를 Hinfl 제한효소로 처리 후 전기영동으로 관찰한 RFLP 실험에서는 C. albicans의 경우 14개 type까지 분류가 가능하였다. 결론 : C. albicans의 세 가지 분자형별법 실험을 종합하여 genotype을 설정한 결과 20가지 이상의 genotype이 관찰되었다. 수집한 균주의 항진균제 감수성 시험결과 C. albicans에서 내성 균주를 검출하지 못하여 분자유전학적 형별과 내성 균주간의 비교 분석은 어려우나 분자유전학적 형별이 다양하여 균주의 MIC와의 연관성은 크게 없을 것으로 사료되며 C. glabrata 균주의 fluconazole 감수성 시험 결과 감수성 균과 S-DD, 내성균이 모두 검출되 어 추후 이들 균주간의 내성기작에 대한 기초 연구를 수행하고자 함.

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