한국산 모기종에 대한 분자생물학적 분류 marker개발

초록

목적 : 국내에 서식하는 모기의 형태학적인 분류의 어려움을 보완하고 정확성을 높이기 위하여 분자마커 (marker)를 이용한 분류방법을 제시함으로서 국내 및 해외유입 가능 모기종의 정확한 분류를 통해 각 지역별 모기 분포를 확인하여 전염병 매개모기에 대한 방제대책 수립 등에 활용한다. 방법 : 모기 유충을 중심으로 국내의 여러 곳에서 채집하여 우화 시켜 해부현미경 하에서 형태적 분류를 먼저 수행한 이후, 모기로부터 DNA를 추출하여 ITS (internal transcribed spacer), CO1 (cytochrome oxidase subunit1), CO2 (cytochrome oxidase subunit2) 부위의 species-specific primer를 제작, PCR을 실시하여 얻어진 산출물을 cloning과 sequencing의 과정을 통해 염기서열을 비교, 분석하여 형태적으로 유사한 모기종 및 complex species의 존재여부 등을 확인하고 이 data를 바탕으로 종 분류에 이용 가능한 부위를 확인하여 종간 특이성을 이용한 multiplex marker 제작 가능여부를 확인한다. 결과 : Anopheles 속의 8종, Aedes 속의 6종, Culex 속의 10종을 채집, sequence 작업을 완료하여 국내 모기간의 종내 변이의 유무를 확인하였고, 채집한 모기의 COⅠ (cytochrome c oxidase subunitⅠ), COⅡ (cytochrome c oxidase subunitⅡ) 및 ITS (internal transcribed spacer) 부위의 primer를 제작하여 PCR을 수행한 결과 제작된 primer가 이상 없이 정상적으로 작동하는 것을 확인하였다. ITS primer는 53℃에서 COⅠ, COⅡ primer는 55℃에서 최적의 작동을 나타내었다. 결론 : 모기의 ITS (internal transcribed spacer) 부위가 종간 구분에 유용한 부위로 확인되었으며, 사용된 국내 모기간의 종내 변이는 확인되지 않았다. 그러나 국내 서식하는 모든 종의 모기 확보 및 종간 변이 확인을 위하여 다양한 지역 및 환경과 채집시기를 고려한 채집을 실시해야 한다.

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