삼일열말라리아의 liver stage antigen을 이용한 잠복기 환자의 조기진단법 개발

초록

목적 : 본 연구는 국내에서 유행하는 삼일열말라리아와 국내로 유입되는 열대열말라리아에 대한 잠복 환자를 색출할 수 있는 조기진단방법을 개발하고자 수행하였다. 방법 : 국내 삼일열말라리아 환자의 적혈구로부터 genomic DNA를 분리하여 간세포 특이항원을 PCR법으로 증폭하였고, 열대열말라리아에 감염된 미얀마환자의 적혈구로부터 동일한 연구를 수행한 후 대장균에서 발현시켜 재조합 단백질을 발현 정제하여 항원항체 반응을 수행하여 조기 진단 가능성을 파악하였다. 결과 : 열대열말라리아의 LSA-1 유전자는 브라질 분리주와 높은 상동성을 보였으며 LSA-3 유전자는 케냐분리주와 높은 상동성을 보였다. 이들 유전자들을 대장균에서 발현시킨 결과，LSA-1은 약 48kDa, LSA-3는 45kDa의 크기를 갖고 있음을 확인하였다. 항원성은 LSA-1이 LSA-3보다 높은 것으로 분석되었다. 삼일열말라리아에 대한 간세포 특이항원 연구 결과, importin α와 가장 유사성이 높은 유전자를 얻었다. 간세포 특이항원이기 보다는 모든 stage에서 발현될 것으로 판단되었다. 삼일열말라리아를 간세포에 직접 침입시켜 분비단백질과 특이항원을 탐색하고자 배양법을 완성하였다. 감염시킨 모기로부터 sporozoites를 분리하여 간세포에 침입시킨 결과, 간세포내에 hypnozoites들을 확인할 수 있었다. 결론 : 열대열말라리아의 간세포 특이항원 두 가지를 얻었으며, 삼일열말라리아의 새로운 drug tar-get인 importin α를 클로닝하여 간세포 특이항원 뿐만 아니라 새로운 약제 개발에 단초를 마련하였으며, 간세포를 이용한 삼일열말라리아 원충의 배양을 성립시킴으로써 hypnozoites의 생물학적 연구를 가능케 하였다.

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