Candida glabrata 임상분리주에서 azole계 내성 관련 단백체 연구

초록

목적 : C. glabrata 균은 azole계 항진균제에 대해 획득내성 또는 자체내성을 나타내는 경우가 많다. 본 연구에서는 azole계 항진균제에 대한 C. glabrata균의 단백체 분석 및 유전학적 발현성과의 상관성 분석으로 azole계 항진균제 내성에 관여하는 단백체를 규명하고자 한다. 2차년도에서는 azole계 항진균제중 하나인 voriconazole에 대해 내성을 갖는 C. glabrata 균을 대상으로 단백질체 분석을 실시함으로써 fluconazole(1차년도) 단백체 분석 결과와의 연관성을 분석하고자 하였다. 방법 : 임상에서 분리된 C. glabrata 46균주를 대상으로 미량액체 희석법을 사용하여 항진균제 감수성 시험을 실시하였다. 감수성별로 균주를 선별하고 균주의 성분별 단백질(세포내, 세포막)을 분리하여 단백질 발현이 증감한 양상을 정성분석과 정량 분석을 통해 2배이상 발현이 증감하는 단백질을 대상으로 LC-MASS 방법으로 서열분석을 실시하고 단백질을 동정하였다. 결과 : C. glabrata 균주중 voriconazole 감수성별 균주를 선정하였다. 단백체 분석 결과, 내성균일수록 세포내 발현이 증가하는 단백질 34개와 발현이 감소하는 단백질 15개를 동정하였으며, 세포막 단백질은 발현이 증가한 12개, 감소한 31개의 단백질을 동정하였다. 동정된 세포내 단백질은 여러 대사에 관여하는 단백질의 발현이 증가하였고 동정된 세포막 단백질의 경우 당분해효소 조절자, cysteinase 등의 효소 발현이 증가한 반면, 발현이 감소한 단백질 중에서 posttranslation modification에 관여하는 단백질, apotosis에 관여하는 단백질등의 발현이 감소하였다. 특이하게 세포막, 세포내 단백질의 발현중 heat shock protein 발현 증감이 여러 spot에서 확인되었다. 결론 : azole 감수성 균보다 내성균에서 세포내 단백질은 발현이 증가, 세포막 단백질은 발현이 감소하는 단백질의 수가 증가. C. glabrata 균의 azole계 항진균제에 대한 내성은 세포막에서 세포 성장, 필요물질 대사를 최소한으로 감소함으로써 항진균제에 대응. 특히 stress 단백질인 heat shock protein이 세포내, 세포막 구분없이 발현 증감이 확인되어 여러 heat shock protein에 대한 내성과의 연관성 분석 필요.

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