국내 공수병 환자에서 분리한 새로운 바이러스주의 특성 고찰

초록

목적 : 중화항체즉정법을 개선하고자 공수병 바이러스 국내 분리주의 glycoprotein(G)을 항원 부위별로 발현하는 재조합 baculovirus를 작성하여 이들 바이러스를 이용한 혈청학적 검사법을 개발하고자 하였다. 또한 공수병 백신 접종자(교상환자 및 고위험군)의 항체가를 측정하여 백신 효능 확인 및 항체 지속기간을 알아보고자 하였다. 방법 : 공수병 바이러스의 G 유전자를 domain 및 antigenic site별로 총 8 부위로 나누어 donor vector에 클로닝 하였으며 Bac-to-BacⓇ baculovirus expression system을 사용 하여 재조합 baculovirus를 제조하였다. Sf-9 세포를 이용하여 단백질 발현을 간접면역형 광항체법(IFA), SDS-PAGE 및 Western blotting으로 확인하였다. 교상 후 치료용 백신 접종자와 고위험군에 속한 백신 접종자의 공수병 바이러스 항체가를 IFA, 중화항체측정법 및 면역효소측정법(PLATELIA™ Rabies Ⅱ)을 사용하여 비교 측정하였다. 결과 : 클로닝된 donor vector 염기서열을 분석하여 공수병 바이러스 유전자 삽입을 확인한 다음 제조사가 제시하는 방법에 따라 재조합 바이러스를 제조하여 IFA, SDS-PAGE 등으로 공수병 G 유전자의 발현을 확인하였다. 중화항체측정법과 면역효소측정법에 의한 백신접종자의 항체가를 측정한 결과 접종 후 1년이 경과한(n=10) 위험군중 중화항체가로 추가접종 대상자는 5명(50%)인 반면 ELISA 항체가로는 그 대상자가 4명이었으나 두 가지 검사법이 일치하는 대상자는 2명이었다. 이러한 차이를 규명하기 위하여 보다 많은 수의 대상자를 조사하여야 할 것이다. 결론 : 전체 G 유전자, domain 및 antigenic site(Ⅱ, Ⅲ 및 IV)로 나누어 총 8개 클론을 작성하였고, recombinant baculovirus rG8를 이용한 항체가 측정은 G 단백질 발현이 적어 항체가가 낮은 혈청검체에는 적합하지 않았다. 백신접종자의 항체가 비교를 통해 고위험군 종사자의 추가접종 시기에 대한 guidline 제시를 위해서 더 많은 연구가 뒷받침되어야 할 것이다.

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